细胞复苏超详细攻略👀🎯实验步骤：💥从液氮罐中取出冻存管，先放在-80℃冰箱几分钟，然后快速放进 37℃水浴锅，不时摇动，2min 内要急速融化哦😜，注意别让冻存管管口没入水中，不然会污染，一般细胞死亡率大概 25%。💥完全融化后，用 75％酒精擦拭冻存管外杀菌，打开盖子，取出细胞悬液，慢慢加到有培养液的 T25 或 T75 培养瓶中，37℃、5%CO 培养🧫。要是细胞要去除冷冻保护剂，就把细胞悬液注入 15mL 无菌离心管，再加 5ml 完全培养基，按细胞类型选合适离心速度，低速离心 5min，弃上清，加 2 - 3mL 预热的完全培养基，轻轻吹匀，让细胞完全重悬。💥用培养液适当稀释后，把重悬的细胞接种到培养皿或 T25、T75 培养瓶，37℃、5%CO 培养，24h 后换新鲜培养基，去除死细胞，三天换一次液，细胞长到 80 - 90%汇合就可以传代啦🤗。🎯注意事项：💥取冻存细胞要做好防护，戴好防冻手套和护目镜，密封不严液氮会被吸入，解冻时可能爆炸，千万小心❗💥细胞在水浴中复苏时，用镊子夹住不时晃动，受热均匀且速度越快越好，能最大程度保存细胞活力，也要防止水进管造成污染😱。💥打开冻存管前，酒精棉球消毒并晾干，无菌操作很重要，复苏后的操作在 4℃冰盒进行，减少冷冻保护剂毒性。💥解冻 2min 内完成，全程尽量别吹打细胞产生气泡，不然细胞生长状态不好😕。💥复苏细胞时避免冻存管接缝处沾水，防止支原体污染，实验室定期用过氧化氢熏蒸，小黑点多就用支原体检测试剂盒检测并清除。#细胞实验 #细胞 #生物实验 #细胞培养 #细胞复苏 #生物与医药 #医学生 #医生 #临床医学 #临床博士