细胞存储温度的把控是确保细胞质量和活性的关键因素。以下是细胞存储温度把控的要点:
一、细胞冻存温度
冷冻速率:细胞的冷冻速率需要控制在适当的范围内,以确保细胞有足够的时间脱水而又不被过度脱水导致损害。对大多数细胞来说,每分钟降低1至3℃是合适的。实际操作中,通常先将细胞在-20℃放置1至2小时,再放入-80℃冰箱过夜(如果没有-80℃冰箱,可以用干冰替代),最后转入液氮罐或低于-130℃的冰箱长期保存。
长期保存温度:细胞长期保存的温度通常是-130℃或更低。液氮罐中气态层的温度在-140℃至-180℃之间,细胞可以保存在这个气态层中,或者浸入液氮中。但为了避免由于液氮进入冻存管而在取出细胞时引起爆炸,最好将细胞保存在气态层中。不过,这样液氮罐内只能存储少量液氮,需要经常添加。
二、细胞复苏温度
细胞复苏时,需要将冻存的细胞快速融化。通常的做法是将冻存管放入37℃水浴中轻轻晃动,使其完全融化。注意不要让水浸到盖子,以防止污染发生。
三、其他注意事项
防冻剂的去除:由于大多数防冻剂与细胞长时间接触时对细胞有毒害,因此最好尽快除去细胞冻存时加入的防冻剂。防冻剂的去除方式和细胞的敏感性有关,有些细胞可以直接将化冻的冻存细胞连同其冻存液加入培养液中培养过夜后换液,而敏感细胞则需要离心去除上清后再加培养液轻轻重悬细胞。
液氮罐操作安全:在使用液氮罐时,需要注意安全。初次冻存者在下降冻存时,宜先用细木棒伸入罐中探测液面位置,然后用温度计与冻存物并行的办法观测下降冻存物的速度、冻存物与液氮液面距离和温度三者关系。此外,在将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作,以免冻伤。同时,对于来自人源性或病毒感染的细胞株应特别小心,避免引起气溶胶的产生和有毒性试剂的伤害。



更多信息内容关注:http://www.yedanguan001.com/
综上所述,细胞存储温度的把控要点包括控制适当的冷冻速率、选择合适的长期保存温度、快速融化细胞以及注意防冻剂的去除和液氮罐操作安全等方面。这些措施有助于确保细胞在存储过程中的质量和活性。
一、细胞冻存温度
冷冻速率:细胞的冷冻速率需要控制在适当的范围内,以确保细胞有足够的时间脱水而又不被过度脱水导致损害。对大多数细胞来说,每分钟降低1至3℃是合适的。实际操作中,通常先将细胞在-20℃放置1至2小时,再放入-80℃冰箱过夜(如果没有-80℃冰箱,可以用干冰替代),最后转入液氮罐或低于-130℃的冰箱长期保存。
长期保存温度:细胞长期保存的温度通常是-130℃或更低。液氮罐中气态层的温度在-140℃至-180℃之间,细胞可以保存在这个气态层中,或者浸入液氮中。但为了避免由于液氮进入冻存管而在取出细胞时引起爆炸,最好将细胞保存在气态层中。不过,这样液氮罐内只能存储少量液氮,需要经常添加。
二、细胞复苏温度
细胞复苏时,需要将冻存的细胞快速融化。通常的做法是将冻存管放入37℃水浴中轻轻晃动,使其完全融化。注意不要让水浸到盖子,以防止污染发生。
三、其他注意事项
防冻剂的去除:由于大多数防冻剂与细胞长时间接触时对细胞有毒害,因此最好尽快除去细胞冻存时加入的防冻剂。防冻剂的去除方式和细胞的敏感性有关,有些细胞可以直接将化冻的冻存细胞连同其冻存液加入培养液中培养过夜后换液,而敏感细胞则需要离心去除上清后再加培养液轻轻重悬细胞。
液氮罐操作安全:在使用液氮罐时,需要注意安全。初次冻存者在下降冻存时,宜先用细木棒伸入罐中探测液面位置,然后用温度计与冻存物并行的办法观测下降冻存物的速度、冻存物与液氮液面距离和温度三者关系。此外,在将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作,以免冻伤。同时,对于来自人源性或病毒感染的细胞株应特别小心,避免引起气溶胶的产生和有毒性试剂的伤害。



更多信息内容关注:http://www.yedanguan001.com/
综上所述,细胞存储温度的把控要点包括控制适当的冷冻速率、选择合适的长期保存温度、快速融化细胞以及注意防冻剂的去除和液氮罐操作安全等方面。这些措施有助于确保细胞在存储过程中的质量和活性。