
眼刺激试验是化妆品安全评价的主要测试项目,化妆品引起的局部眼刺激通常包括结膜、角膜、虹膜和泪腺的作用, 基于体内眼刺激作用发生的机制,目前已开发了多种替代方法。
一.鸡胚绒毛膜尿囊膜实验(HET-CAM)
1.实验目的
测试受试物引起鸡胚绒毛尿囊膜毒性变化的能力,从而客观评估物质潜在的眼刺激性程度。
2.实验原理
鸡胚绒毛尿囊膜试验是一种较早被采用的眼刺激性体外评估方法,是利用鸡胚绒毛膜尿囊膜结构与人结膜相似的特点开发的替代方法。绒毛尿囊膜(CAM)是一个呼吸性膜,包围在鸡胚周围。本试验利用孵化的鸡胚中期绒毛尿囊膜血管系统完整、清晰和透明的特点,将受试物直接接触CAM膜,于5 min之后观察绒毛尿囊膜毒性效应指标(主要为:出血、凝血 和血管融解)的变化,这些指标反映血管及血管网的形态结构、颜色和通透性的变化,以及反映绒毛尿囊膜蛋白质变性等现象及其受损程度,然后组合得到一个评分,用于评估受试物的眼刺激性。
二:绒毛膜尿囊膜血管试验(chorioallantoic membrane vascular assay.CAMVA)
是简化了的 HET-CAM方法,只观察受试物暴露CAM 30 min后血管的变化(出血、血管溶解和凝血),计算使50% 的鸡胚出现上述损伤的受试物浓度。CAMVA法适 用于轻度到中度眼刺激性化合物的检测,也可正确区分刺激物和非刺激物。
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