詹韦免疫生物学（原书第十版）PDF超清带书签目录~

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AlphaFold3：预测转录因子与靶基因启动子互作 直奔主题，先上应用总结： 优点：利用AlphaFold3预测转录因子蛋白与靶基因启动子DNA互作，目前大概是生信预测类中最准确的方法。充分使用该工具，会让互作机制研究会更容易些，make it easier，和我们公司的服务理念一致。建议结合其他生信分析网站，如JASPAR、hTFtarget等网站（干实验数据），或充分整合自己项目的ChIP-Seq互作组数据（湿实验数据），进行初步分析，然后再用AlphaFold3进行预测验证，将会提高

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TRIB3与Smurf1互作促进自身泛素化 TRIB3非泛素化酶，却能抑制Runx2/Smad1降解并促其积累，其机制涉及何种E3泛素连接酶？ 1.筛选关键E3连接酶：Smurf1 通过生物信息学分析及功能验证，发现Smurf1（而非Smurf2）是TRIB3调控Runx2和Smad1蛋白水平的关键E3泛素连接酶。TRIB3过表达增加Runx2/Smad1蛋白，而Smurf1共表达可逆转此效应。TRIB3缺失导致细胞在磷刺激下内源性Smurf1积累，提示TRIB3负调控Smurf1稳定性。 2.TRIB3促进Smurf1自身K48链泛素化与降解 免疫共沉淀实验（Co-IP）证实

骨髓还是生发中心？

筛选ARIH1互作蛋白的方法与关键发现： 为了探究ARIH1促进结直肠癌（CRC）进展的分子机制（特别是其影响线粒体功能的途径），研究者采用了免疫沉淀-质谱联用分析（IP-MS） 来系统性地筛选与ARIH1相互作用的蛋白质。 1.核心筛选方法：IP-MS该方法利用特异性抗体将细胞裂解液中的ARIH1蛋白及其结合蛋白（互作蛋白）“拉下来”（免疫沉淀，IP）。随后，将沉淀下来的蛋白质复合物进行酶解，并通过高灵敏度质谱（MS） 进行鉴定和定量分析。MS结果提供了

基本看不懂完全不理解，也就是说原生态的免疫生物学在过去可能40年代全面禁止了，而德国骷髅军我不知道还存在不存在。

韩少坤与红螺菌：三十多年科学探索的奇妙之旅 文字来源于人工智能 在微生物学的浩瀚星空中，红螺菌以其独特的生理特性和广泛的应用前景，成为了众多科学家研究的热点。而韩少坤，一位对微生物世界充满无限好奇与热情的科研工作者，他与红螺菌之间的故事，就像是一段科学探索的奇妙之旅，充满了发现与挑战。 韩少坤，一位在微生物学领域深耕多年的专家，他的科研生涯始终围绕着对微生物的深入理解和应用展开。红螺菌，作为一种典型的

图1中说，巨噬细胞通过巨胞饮作用摄于胞外物质，而图2中图1.19是DC 通过巨胞饮作用提呈抗体，那么会是巨噬细胞吞噬胞外物质后再提呈给DC 细胞，还是DC 细胞本身也有不依赖受体的巨胞饮作用呢

如题，鼠鼠是一个本科生，这学期开免疫学，有好多东西，请问该怎样学习呢

泛素修饰类型和靶蛋白修饰位点 1. 使用HA-Ub-WT/KO泛素修饰系统检测修饰类型 步骤： HA-Ub-WT和HA-Ub-KO系统：使用HA标记的野生型泛素（HA-Ub-WT）和赖氨酸突变型泛素（HA-Ub-KO，如K6R、K11R、K27R等）载体，与泛素连接酶（E3）和修饰底物共转染细胞。 CoIP-WB检测：通过免疫共沉淀（CoIP）和蛋白质印迹（WB）检测底物的泛素化水平，明确E3连接酶对底物的泛素修饰类型。 小贴士： HA-Ub-KO系统可以帮助排除特定赖氨酸位点的泛素化作用。 通过对比不同突变体的泛

XFD660 马来酰亚胺是硫醇反应性染料，用于标记巯基，。XFD660 适合成像和流式细胞术应用。在pH 4-10范围内荧光不受影响且光稳定性好。XFD660 的马来酰亚胺衍生物通常用于与蛋白质、寡核苷酸或低分子量配体上的硫醇基团结合，产生的结合物与其他光谱相似的荧光团相比，荧光亮度明显更高，光稳定性更强。 马来酰亚胺在中性条件下很容易与蛋白质、经巯基修饰的寡核苷酸和其他含巯基分子中的巯基发生反应。所得的染料偶联物相当稳定。 AF660马来酰

一、百萤AF700 NHS 酯 *与 Alexa Fluor 700 NHS 酯的结构相同*参数 Ex(nm) 696 Em(nm) 719 分子量 ~1400 溶 剂 DMSO 存储条件 在-15℃以下保存，避光防潮 反应基团 NHS酯 二、百萤AF700 NHS 酯 *与 Alexa Fluor 700 NHS 酯的结构相同*优势 1.易于结合：高效地将伯胺标记在蛋白质、抗体和胺修饰的寡核苷酸上 2.荧光明亮且稳定：在pH 4-10范围内荧光不受影响且光稳定性好 3.亲水性好：减少聚集，提高信号清晰度，适用于高级成像和活细胞研究 三、百萤AF700 NHS 酯 *与 Alexa Fluor 700 NHS 酯

肝细胞癌（HCC）是一种与慢性肝病和肝硬化密切相关的原发性肝脏恶性肿瘤。目前，免疫治疗和化疗是HCC患者最好的治疗选择，但大多数HCC患者在手术切除或消融后复发。因此，迫切需要更有效的治疗选择，而分子靶向治疗是一种很有前景的方法，可以提供更好的结果，降低全身毒性，减少副作用。 2024年8月，广州中医药大学研究团队在Advanced Science（IF=14.3）上发表了题为“Ponicidin Promotes Hepatocellular Carcinoma Mitochondrial Apoptosis by Stabilizing KEAP1-PGAM5 Complex

一、百萤 AF568酸 等同于Alexa Fluor 568acid参数 Ex(nm) 579 Em(nm) 603 分子量 807.74 溶剂 DMSO 存储条件 在-15℃以下保存，避光防潮 荧光颜色 红色 二、百萤 AF568酸 等同于Alexa Fluor 568acid适用范围 主要用于标记抗体、蛋白质和寡合苷酸 三、百萤 AF568酸 等同于Alexa Fluor 568acid概述 AAT Bioquest 生产的XFD 568 酸与AlexaFluor®568酸的分子相同，是一种明亮的红色荧光染料，在pH 4-10范围内荧光不受影响且光稳定性好。适用于多色荧光显微镜、流式细胞术和dSTORM等先进成像技术。

iFluor 647琥珀酰亚胺酯对标记蛋白质（特别是抗体）进行了优化。这些染料明亮、光稳定，并且对蛋白质的猝灭作用最小，是与蛋白或抗体偶联的常用工具。NHS 酯可用于标记蛋白、胺修饰的寡核苷酸和其他含胺分子的伯胺 (R-NH2)。 图示 图1.用小鼠抗微管蛋白染色HeLa细胞，再用iFluor647山羊抗小鼠IgG (H+L)（红色）染色；细胞核用DAPI染色（蓝色）。 图2.HeLa细胞与小鼠抗微管蛋白孵育，再分别与iFluor647山羊抗小鼠IgG偶联物（红色，左）或AF647山羊抗小鼠IgG（

Keap1是小胶质细胞中USP7去泛素化的直接底物 第一步，筛选USP7底物蛋白 基于氨基酸的稳定同位素标记（SILAC）蛋白质组学，其中5种在EB处理后显著下调（图2a）。其中，Keap1在炎症过程发挥关键作用。因此，推测Keap1可能是USP7激活小胶质细胞的潜在底物蛋白。放线菌酮（CHX）细胞，发现EB依赖的Keap1降解明显加快（图2b）。 第二步，验证USP7与Keap1相互作用 Co-IP实验发现，USP7与Keap1相互作用（图2c）。免疫荧光分析显示EB通过促进USP7核转位来抑制USP7-keap1共

通过anti-CARM1 ChIP-seq实验，共鉴定出17,749个carm1特异性结合峰和4,866个独特的启动子基因（图1a）。KEGG分析发现，这些基因参与HIF-1、Wnt、VEGF等信号通路（图1b）。ChIP-qpcr检测显示，CARM1在CARM1、CDK4、Cyclin D1、β-Catenin、HIF1A、MALAT1, MAT2A、VEGFA和Vimentin等启动子上强富集，验证了ChIP-seq结果（图1c）。对所选基因进行anti-H3R17me2a和anti-H3R26me2a ChIP-qpcr分析，显示H3R17me2a和H3R26me2a占据了目标启动子（图1d）。进一步表明，这些启动子被CARM1占据。 敲减CARM1进行RNA-seq

罗丹明123是常用的线粒体染色剂，可以用于染色各种细胞，包括植物细胞和细菌；据数据分析，罗丹明123也可能是MRP1的底物。比MDR的功能检测预后指标更好。 图1.罗丹明123 CAS62669-70-9化学结构 罗丹明123 CAS62669-70-9参数 Ex(nm) 508 Em(nm) 528 分子量 380.82 溶剂 DMSO 存储条件 在-15℃以下保存，避光防潮 罗丹明123 CAS62669-70-9适用范围 1.用于标记活细胞的线粒体，还用于测量线粒体膜电位 2.选择性地定位于癌细胞，检测癌细胞 3.用于流式细胞术中作为P-糖蛋白报告

第一步，确定调节YBX1表达的潜在机制---泛素-蛋白酶体降解途径 为了进一步确定调节YBX1表达的潜在机制，泛素-蛋白酶体降解途径和自噬-溶酶体途径是细胞内蛋白质降解的两种重要途径。用MG132、3MA和CQ处理原代神经元（3MA是一种广泛使用的抑制细胞自噬的抑制剂，可抑制III类PI3K；CQ通过增加酸性内体/溶酶体的pH值来破坏溶酶体功能；MG132是一种广泛使用的泛素-蛋白酶体降解途径抑制剂。），发现MG132处理后，YBX1的表达水平升高（图2a）。表明泛素-蛋

癌症的正确医学术语应该叫做IV-型超敏反应性疾病 作者：韩少坤 摘要： 癌症的病因一直是一个谜，实质上癌是一种潜生体，是对恶性炎症的一种适应性变化，主旨在于隔离炎症损伤因子，避免造成更大的伤害。这种变化在生物界普遍存在，如细菌潜生体的方式有助于其种系的稳定，还有如包涵体和老茧等病理结构，其产生过程和生物学功能都基本差不多，所以从某种意义上讲癌细胞类似于包涵体和老茧一样对身体是有益的。癌症是IV-型超敏反应的次

组学发现：作者通过RNA-seq技术，检测沉默circRNA的PANC-1/GEM耐药株细胞与对照细胞，发现739个差异基因， 包括520个上调基因和219个下调基因。这些差异基因在多种DNA损伤修复通路中富集，包括碱基切除修复、错配修复和核苷酸切除修复。在这些通路中，包含显著下调的共同基因LIG1。LIG1是DNA连接酶家族的成员，在几乎所有DNA损伤修复通路中发挥着重要作用。 应答检测：在GEM抵抗的PDAC组织中，LIG1也高度表达，并且与PDAC组织中的circRNA表达呈正相关。沉默c

小麦胚芽凝集素(WGA)概述 小麦胚芽凝集素（WGA）是一种植物源性的凝集素，主要从小麦胚芽中提取到，是目前研究最多且最有用的凝集素之一． 小麦胚芽凝集素(WGA)适用范围 用于标记哺乳动物细胞、革兰氏阳性细菌、酵母细胞纤维化瘢痕组织的细胞膜，从而进行荧光成像和分析。也可用于免疫荧光（IF）、免疫组织化学（IHC）和流式细胞术（FC）。 小麦胚芽凝集素(WGA)优点 1.高信噪比 2.荧光强度高 3.不受膜电位控制 4.适用于活细胞和固定细胞 5.对 N-乙

酪胺染料的标记，可能会遇到的问题： 1.非特异性染色：酪胺染料在被HRP催化后，氧化的酪胺具有高度反应性，可能与样本中多个位置的蛋白质发生共价结合，导致背景信号增加。 建议：优化过氧化氢和酪胺的浓度，能减少非特异性染色。降低酶反应时间也有助于减少背景信号。这些都需要客户根据自己的实验进行调整，我们无法给他们一个确定的浓度去尝试。因为不同的实验，环境，操作，都会出现不同的结果。 2.过度放大导致的信号溢出：TSA是

巴斯德发明的狂犬病疫苗就是脱敏疗法 作者：韩少坤 脱敏疗法：在临床上确定过敏性疾病患者的变应原后，将该变应原制成变应原提取液，并配制成各种不同浓度的制剂，经反复注射或通过其它给药途径与患者反复接触，剂量由小到大，浓度由低到高，从而提高患者对该种变应原的耐受性，当再次接触此种变应原时，不再产生过敏现象或过敏现象得以减轻。 　一，1885年巴斯德的原创发明： 　　经过多次试验，巴斯德创造性地发明了活体培养法制取

铁死亡是由膜磷脂上的多不饱和脂肪酸部分过度过氧化引起的。常见的铁死亡反应由GPX4依赖和非GPX4依赖两种方式调节，前者主要有三种磷脂（磷脂酰乙醇胺[PE]、磷脂酰丝氨酸[PS]和磷脂酰肌醇[PI]）参与铁死亡。PHLDA2是一种对磷脂具有高亲和力的膜相关蛋白，ALOX12能够通过其脂氧合酶活性特异性氧化游离的多不饱和脂肪酸。那么，不依赖GPX4的PHLDA2是如何启动铁死亡的？ 第一步，PHLDA2能够将ALOX12募集到特定的磷脂上 研究PHLDA2与不同类型磷脂的结合亲和

一、百萤 pH荧光探针Protonex 红600参数 Ex(nm) 576 Em(nm) 597 分子量 698.94 溶 剂 DMSO 存储条件 在-15℃以下保存，避光防潮 二、百萤 pH荧光探针Protonex 红600概述 Protonex Red染料显示出pH依赖性荧光。与大多数在较高pH下荧光更强的荧光染料不同，酸性条件可增强Protonex Red染料的荧光。随着pH从中性降低到酸性，Protonex Red染料的荧光急剧增加。细胞外缺乏荧光消除了洗涤步骤。Protonex Red染料为监测酸性细胞区室（如内体和溶酶体）提供了强大的工具。Protonex Red染料

第一步，PHLDA2与ALOX12功能相关性 建立ALOX12-tet-on细胞。ALOX12促进了细胞铁死亡，在失去PHLDA2后，ALOX12诱导的铁死亡水平显著降低（图1e），脂质过氧化水平也被消除（图1f）。表明ALOX12介导的脂质过氧化和铁死亡依赖于PHLDA2的表达。 第二步，PHLDA2与ALOX12的互作是诱导铁死亡所必需的 另外，PHLDA2缺失后，野生型(WT) PHLDA2的表达恢复了铁死亡应答，而单独重新表达与ALOX12结合的PHLDA2-PH亦足以恢复铁死亡反应，PHLDA2-ΔPH则不能（图1g）。在人类肿瘤标本COSMIC数

第一步，确定与下游蛋白分子的互作关系 进行内源Co-IP实验和GST pulldown实验，发现USP8与GPX4互作（图1a-c）。 第二步，USP8与GPX4蛋白结合的具体位置 为了探索USP8与GPX4蛋白结合的位置，针对USP8构建不同的突变体分别进行Co-IP实验，发现USP8通过 aa1-313、aa715-1118区域与GPX4结合（图1d-e）。 第三步，USP8如何影响GPX4蛋白的稳定性 USP8是一个去泛素化酶。Co-IP分析发现，USP8能降低GPX4的泛素化水平，而酶非活性突变体USP8-c786a则不能去除GPX4的泛素链，表明USP8通过其

第一步，AARS1分别乳酸化YAP和TEADK90和K108位点 乳酸化蛋白质组学KEGG分析富集多种通路，重点集中在Hippo信号通路上，YAP和TEAD1分别在K90和K108位点发生了乳酸化（图1a-b）。IP-WB检测也显示YAP-TEAD发生乳酸化（图1c）。此外，构建YAP K90R和TEAD1 K108R突变体进行IP-WB检测显示没有发生乳酸化（图1d）。另外，葡萄糖剥夺降低YAP-TEAD1的乳酸化水平，而乳酸处理明显恢复其的乳酸化水平（图1e-f）。 第二步，AARS1与YAP-TEAD1相互作用 Co-IP实验发现AARS1与YAP-TEAD1互作（图1g

第一步，探讨PRMT1在肝细胞癌中上调的机制 已有结果显示，PRMT1的蛋白水平在HCC中上调，但PRMT1 mRNA水平没有变化。推测泛素-蛋白酶体降解可能参与PRMT1的上调。用两种不同的蛋白酶体抑制剂处理细胞，发现PRMT1蛋白水平呈剂量依赖性增加（图1a），表明PRMT1的蛋白水平可以通过泛素介导的降解来调节。 第二步，确定PRMT1降解的关键泛素连接酶 根据设计的筛选策略，E3泛素连接酶FBXO7为候选互作蛋白（图1b-c）。IP-MS分析显示FBXO7是前10个与PRMT1相互作用的候

IP去泛素化类型检测实验发现，LKB1的泛素化修饰主要发生在K6链泛素化，而不是传统的K48和K63位点（图1e-h）。 更多详细内容分享可查阅：【国刊之光《STTT》(IF=39)：基于去泛素酶的药靶开发转化。JOSD2解除LKB1复合体活性促进肺癌发生】 。 如您有泛素相关机制研究，欢迎留言探讨。

一、百萤活性氧Cell Meter线粒体羟基自由基检测试剂盒简介 细胞内羟基自由基的检测对于理解适当的细胞氧化还原调节及其失调对各种病理的影响至关重要。羟基（HO·）是与其他分子高度反应的活性氧（ROS）之一，以实现稳定性。通常，羟基被认为是氧化代谢的有害副产物，其可以在生命系统中引起分子损伤。它显示平均寿命为10-9秒，可以与几乎所有生物分子如核DNA，线粒体DNA，蛋白质和膜脂质发生反应。 MitoROS OH580是活细胞渗透探针，可以快速和选

1.什么是DiI？它的用途是什么？ 答：DiI即DiIC18（3）是常见的细胞膜荧光探针之一，全称为1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine 。呈现橙红色荧光。DiI是一种亲脂性膜染料，进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐使整个细胞的细胞膜被染色。DiI在进入细胞膜之前荧光非常弱，仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiI被激发后可以发出橙红色的荧光。它的家族还有DiR、DiO、DiA、DiS、DiD。 2.如何区别DiI探针中的C12、C16、C18？ 答：从水溶性

糖尿病肾病（DKD）是一种普遍存在的慢性肾脏疾病，是终末期肾病进展的主要原因。足细胞是覆盖GBM外表面的高度分化的上皮细胞，对于维持GBM的完整性至关重要。因此，足细胞损伤的程度通常用来评估DKD的进展。此外，足细胞中的炎症积聚与足细胞损伤的加重密切相关。 2024年6月，温州医科大学梁广团队在Nat Commun（IF=14.7）上，发表“Podocyte OTUD5 alleviates diabetic kidney disease through deubiquitinating TAK1 and reducing podocyte inflammation and injury”的研究成果。揭示

AARS1作为一种蛋白质乳酸转移酶，使用乳酸作为直接的乳酸供体 第一步，AARS1与乳酸存在结合 分子对接预测乳酸可以很容易地结合到AARS1的催化口袋上（图1a）。等温滴定量热法验证了该结果（图1b）。 第二步，确定AARS1是一种乳酸转移酶 体外乳酸化实验，显示AARS1能够以依赖于乳酸和ATP的方式直接使组蛋白H3和H4乳酸化（图1c）；质谱分析，显示AARS1能直接在K18处乳酸化H3肽（图1d）。AARS1催化袋内氨基酸残基突变体（5M）消除了其乳酸转移酶活性（图1c-d

简牍：疾病靶点泛素修饰调控机制研究思路。 Step1：根据临床需求和文献，凝练临床科学问题。 Step2：根据临床科学问题，确定泛素修饰靶点。 Step3：明确修饰靶点的细胞动物模型功能 Step4：解析泛素修饰酶，修饰类型和位点、以及下游机制分子调控方式等。该研究为病理提供新视角、为诊疗提 供新策略。 正文： 互作机制研究是临床基础研究的难点，修饰互作机制研究是互作机制研究上的明珠。泛素化修饰机制研究，主要目标是深入理解泛素化过程

UBE2C促进SNAT2的单泛素修饰，抑制其多泛素修饰。 检测步骤： 第一步，筛选UBE2C蛋白底物SNAT2 IP-MS和泛素蛋白质组学检测发现：SNAT2是UBE2C泛素修饰的底物（图1a）。 第二步，UBE2C与SNAT2相互作用 Co-IP等实验检测证实UBE2C与SNAT2相互作用（图1 b-c）。 第三步，发现UBE2C促进SNAT2的单泛素化，阻断K63连接的泛素链的延伸 Co-IP分析显示发现UBE2C促进SNAT2的单泛素化，但阻断了泛素链的延伸（图1 d-e）。分别构建不同泛素突变体Ub-WT,K6R,K11R,K 27R, K29R, K33R，K48R，K63R(基

1.百萤活性氧(ROS)概述 活性氧(ROS)是具有化学活性的含氧分子，是作为细胞代谢的副产品自然产生的。在生理条件下，ROS水平受到仔细调节，它们在正常细胞信号转导、细胞周期、基因表达和体内平衡中充当信使。 当过量产生时，ROS有可能导致许多有害事件。在高浓度下，ROS会在细胞中诱导氧化应激，从而导致细胞大分子（如核酸、膜脂和细胞蛋白质）的后续损伤。这些生物分子的氧化损伤可引发细胞凋亡，与衰老有关，并与多种疾病、癌症和神经退

一、百萤 活性氧ROS Brite HPF简介 活性氧（ROS）是含氧的化学反应性分子（如超氧化物，羟基，单线态氧和过氧化物）。由于存在不成对的价电子，ROS具有高反应性。 ROS形成氧的正常代谢的天然副产物，并且在细胞信号传导和体内平衡中具有重要作用。然而，在环境压力（例如，UV或热暴露）期间，ROS水平可显着增加。这可能导致细胞结构的显着损害。累积地，这被称为氧化应激。 ROS也由外源性源如电离辐射产生。在氧化应激条件下，ROS产生显着增加

三阴性乳腺癌（TNBC）是乳腺癌中最恶性的亚型。TP53突变是肿瘤常见的抑癌转促癌突变。在TNBC患者中，TP53突变率高达80%，其突变会导致化疗耐药或免疫治疗效果差等临床问题。因此，迫切需要阐明分子机制并确定TNBC进展的新靶点。 2024年7月，山东大学杨其峰团队在Adv Sci（IF=14.3）上，发表“CircCFL1 Promotes TNBC Stemness and Immunoescape via Deacetylation-Mediated c-Myc Deubiquitylation to Facilitate Mutant TP53 Transcription”的研究成果，提示了TNBC中突变TP53调控的新机制，并为TNB

1.百萤 SO Green 520WS单线态氧探针参数 Ex -- Em -- 分子量 N/A 溶剂 DMSO 存储条件 在-15℃以下保存，避光防潮 2.百萤 SO Green 520WS单线态氧探针介绍 SO Green 520WS 单线态氧探针被开发为水溶性荧光探针，用于检测细胞外单线态氧，因为它不渗透细胞。它对单线态氧具有高度选择性。与其他可用的荧光和化学发光单线态氧检测试剂不同，SO Green 520WS 单线态氧探针不会对羟自由基、超氧化物或其他活性氧 (ROS) 显示任何明显的响应。该指示剂仅呈现微弱的蓝色荧光。

鼻咽癌（NPC）是一种影响头颈部的癌症。目前，化疗是局部晚期鼻咽癌（LA-NPC）患者的标准方案。然而，约10%的鼻咽癌患者出现化疗耐药，导致预后不理想。因此，阐明化疗耐药的分子机制至关重要。 2024年7月，中山大学唐玲珑和赵银团队在Adv Sci（IF=14.3）上，发表“DCAF7 Acts as A Scaffold to Recruit USP10 for G3BP1 Deubiquitylation and Facilitates Chemoresistance and Metastasis in Nasopharyngeal Carcinoma”的研究成果，发现DCAF7在体外和体内促进鼻咽癌细胞的顺铂耐药和转移。 图

乳酸丰富是肿瘤的结果，肿瘤即使在含氧量正常的情况下，也会利用糖酵解作为能量代谢的主要来源，这种Warburg效应，促使肿瘤细胞具有丰富的乳酸代谢特征。存在即合理，肿瘤乳酸的促癌机制，是肿瘤靶点开发的重要内容。 2024年3月，同济大学、复旦大学及安徽科技大学等多单位合作在J Clin Invest（IF=13.3）上，发表“The alanyl-tRNA synthetase AARS1 moonlights as a lactyltransferase to promote YAP signaling in gastric cancer”的研究成果，研究发现tRNA合成酶丙氨酰-tRNA合成

样品制备、电泳、转膜、封闭、一抗、二抗、显色 一、蛋白准备（样品制备） （一）总蛋白提取(弱的RIPA裂解液或WB裂解液）1.方法一（胰酶消化）：去除细胞上清培养基，PBS清洗1-2次，加入适量胰酶消化，放置37℃，5%CO2培养箱中（不同细胞消化时间不同），消化完全，2倍于胰酶体积的完全培养基终止反应，吹散混匀，吸入至15 mL 离心管，1000-1500 rpm，离心3-5 min。 2.方法二（用细胞刮将细胞刮下）：留1-2 mL细胞上清培养基，将培养皿放置冰上用细胞刮

一、百萤 Annexin V-Cy5标记简介和工作原理 细胞凋亡是细胞的基本特征之一，它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定和一些疾病发生过程等方面起着十分重要的作用。 在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。在体内，巨噬细胞可以识别翻转到细胞膜表面的PS 从而将这些程序性死亡的细胞清除，因此凋亡过程中并不伴随局部的炎症反应，而在细

百萤 Annexin V-AF488标记参数： Ex(nm)：499 E m(nm)：520 分子 量：~36000 溶 剂：Water 存储条件：在零下15度以下保存，避免光照 百萤 Annexin V-AF488适用仪器 （1）流式细胞仪 激发：488nm激光 发射：530/30nm滤波片 通道：FITC通道 （2）荧光显微镜 推荐孔板：黑色透明 通 道：Pacific Blue通道 百萤 Annexin V-AF488实验方案 概述 用测试化合物（200μL/样品）制备细胞 添加Annexin V结合物测定溶液 室温孵育30-60分钟 用流式细胞仪或荧光显微镜分析 1.用膜联蛋白V缀合物制备和孵

一、百萤 Annexin V-Cy3标记概述： Annexin V-Cy3标记是用于检测细胞功能的探针，膜联蛋白是钙依赖性磷脂结合蛋白家族。 它们富含真核生物，属于参与信号转导的普遍存在的细胞质蛋白家族。 膜联蛋白V的优先结合配偶体是磷脂酰丝氨酸（PS），其通常保持在细胞膜的内叶（细胞质侧）。 在细胞凋亡中，PS被转移到质膜的外部小叶。 磷脂酰丝氨酸在细胞表面上的出现是细胞凋亡的初始/中间阶段的通用指示，并且可以在观察到形态变化之前检测到。 我们的